《生物化学实验》教学大纲

（Experiment of Biochemistry）

一、基本信息

课程代码: 1031312              

学    分：1.5

总 课 时：51

课程性质：必修课

适用专业：食品科学与工程、生物工程、食品安全与质量本科专业

先修课程：无机化学、分析化学、有机化学、物理化学及实验

二、本课程教学目的和任务

生物化学是食品科学与工程、生物工程、食品安全与质量专业的专业基础课，学习和掌握生化理论及生物化学实验手段是本专业学生必备的基础，对生物及食品制备、检测具有重要的指导和实践意义。生物化学是一门实验性学科，生物化学实验则是论证生化理论和学习生化实验技术的一门实践性学科，它是以生化理论为基础而又具相对独立性的课程。我们要求学生在掌握生化理论的基础上通过实验进一步加深理解课堂的教学内容，同时掌握必要的生化实验技能，逐步提高学生分析问题和解决问题的能力，为以后独力工作打下基础。

三、教学方法与手段

实验教学，单班一次，2人一组，独立操作完成。

四、教学内容及要求

实验一：蛋白质含量测定（6课时）

光谱分析是测定蛋白质含量最常用的方法，本实验是利用比色计进行比色的定量分析实验，要求学生掌握双缩脲法、染料法及紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理和方法，熟练721分光光度计，751紫外分光光度计的使用。

实验二：血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳（4课时）

利用电泳分离和鉴定蛋白质的组成是当前生化实验中的主要技术，要求学生掌握电泳的基本原理及操作，巩固课堂上学到的蛋白质两性离子的性质及在实践中的应用。

实验三：凝胶等电聚焦法测定蛋白质等电点（8课时 选做）

    利用蛋白质等电点净电荷为零，采用另一种电泳方法分离蛋白质，要求学生掌握电聚焦电泳技术，熟练操作。

实验四：牛奶中酪蛋白的制备（3课时）

此为制备性实验，要求学生根据蛋白质在等电点溶解度最小的性质学习从牛乳中制备酪蛋白的技术。

实验五：细胞色素C的制备及测定（12课时）

    本实验为综合性的大实验，共分四次做完。一、细胞色素C的抽提（3），二、盐析除杂蛋白（粗分离）（3），三、三氯乙酸选择性变性沉淀细胞色素C及透析（3），四、细胞色素C的测定（3）。要求学生通过实验掌握抽提、盐析、选择性变性沉淀、透析等蛋白分离提纯的基本技术，提高综合实验技术的能力。

实验六：α—淀粉酶活力测定（3课时）

α—淀粉酶是应用最多的淀粉液化和糖化的酶，广泛应用于发酵工业，测定其活力是生产淀粉酶的重要环节，本实验要求学生在了解淀粉酶的性质、作用及特点基础上进一步掌握测定α—淀粉酶的原理和方法。

实验七：蛋白酶活力的测定（3课时）

蛋白酶是食品工业中一个常用的酶，要求学生掌握测定蛋白酶活力的基本方法。

实验八；酵母蔗糖酶Km及V值的测定（4课时）

由于米氏常数是酶的特征常数之一，要求学生掌握米氏常数的测定方法，进一步熟练721分光光度计的使用。

实验九：酶作用的专一性及PH，温度对酶活性的影响（3课时选做） 

    这是一个以观察淀粉酶活力变化来研究酶性质的实验，要求学生通过本实验来理解影响酶活力的重要因素，学会测定酶最适PH及温度的方法。

实验十：动物组织中核酸的提取与鉴定（6课时）

    本实验要求学生学会从动物组织中提取RNA和DNA的原理和操作技术并鉴定核酸的组成成分。

实验十一：核酸的定量测定——紫外吸收法（3课时）

    本实验要求学生掌握紫外吸收法测定核酸含量的原理及方法。

实验十二：氨基酸薄层层析（3课时选做）

利用薄板层析鉴定各种氨基酸是生化分析中常用的方法，要求学生通过实验初步掌握薄板层析的基本技术及氨基酸鉴定方法。

实验十三：脑脂质的提取和硅胶薄层层析对脑脂质的分离鉴定（7课时）

本实验要求学生掌握脂质萃取和薄板层析的原理及操作（制板、活化、点样、平衡及展层、显色）。

实验十四：糖酵解中间产物3一磷酸甘油醛的鉴定 （3课时）

通过对糖酵解中间产物3一磷酸甘油醛的鉴定，要求学生掌握测定中间产物的原理及方法。

五、教学时数分配表

六、考核方式及成绩评定标准

    考核方式：操作考试和理论考试结合

    成绩评定标准：实验报告成绩占40%；实验操作成绩占30%；期末考试成绩占30%；成

绩评定为百分制。

七、教材及主要参考书

教材：张燕平编，生物化学实验指导，院内讲义，2004

参考书目：

[1]、方家驹.生物化学实验教程，人民卫生出版社，1993

[2]、北京农业大学主编，动物生物化学实验指导，1986

[3]、郭尧君.蛋白质电泳技术，科学出版社，1999

[4]、赵亚华.生物化学实验技术教程，华南理工大学出版社，2000

[5]、张龙翔等.生化实验方法和技术，第二版，高教出版社，1997

 执笔人: 张燕平